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預(yù)期用途

是一種經(jīng)過認(rèn)證的校準(zhǔn)溶液，專為PTX2的分析方法開發(fā)和準(zhǔn)確定量而設(shè)計(jì)。CRM-PTX2-b的濃度使其適合于制備用于校準(zhǔn)液相色譜（LC）和液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）儀器的稀釋系列，以及用于回收實(shí)驗(yàn)的貝類對照樣品的加標(biāo)。

CRM的準(zhǔn)備

是在新西蘭Cawthron研究所從一個(gè)浮游植物水華中分離出來的，那里的尖脊藻是主要物種。2001年2月初，在新西蘭布勒灣海岸3-4公里處采集了浮游植物，并通過前面描述的一系列色譜步驟進(jìn)行了純化[2]。通過將純化的PTX2溶解在CD3OH（~4mM）中來制備儲備溶液。然后通過定量NMR測定該儲備溶液中PTX2的濃度[5]，之后通過在脫氣的高純度甲醇中準(zhǔn)確稀釋PTX2儲備溶液并制備最終體積為2L來制備CRM溶液。將該溶液用Teflon攪拌棒和磁力攪拌器充分混合，同時(shí)在氬氣氛下的冰浴中冷卻。將等分試樣分配到琥珀色玻璃安瓿中，并在氬氣下火焰密封。然后對安瓿進(jìn)行標(biāo)記、包裝，并立即轉(zhuǎn)移到-80°C下長期儲存。每個(gè)安瓿含有大約0.5毫升溶液。

結(jié)構(gòu)確認(rèn)和純度評估

通過1H核磁共振（NMR）（圖1）和LC-MS/MS證實(shí)了用于制備CRM-PTX2-b的PTX2的結(jié)構(gòu)和純度。產(chǎn)物離子光譜顯示出PTX2的碎裂。LC-MS還用于估計(jì)PTX2-b儲備溶液的一般純度（柱：2.5µm Luna C18（2），100×2 mm；水（A）、分別含有2mM甲酸銨和50mM甲酸的乙腈/水（95/5）（B）（pH 2.3）；以200µL/min的速度在15分鐘內(nèi)達(dá)到5至100%的B+20°C柱溫）。觀察到一種部分溶解、未鑒定的異構(gòu)體和PTX2c（圖2）。使用等度LC法（柱和流動相如上；55%B，250µL/min；+20°C柱溫），雜質(zhì)相對于PTX2的保留時(shí)間分別為1.07和2.05。當(dāng)在等度洗脫和選定離子監(jiān)測（SIM）條件下監(jiān)測時(shí)，CRM溶液含有約2.5%的未解析異構(gòu)體和2.6%的PTX2c。這些次要化合物的比例僅作為信息值提供，未經(jīng)認(rèn)證。

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